熒光染料：是指吸收某一波長的光波后能發(fā)射出另一波長大于吸收光的光波的物質(zhì)。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物?？梢詥为毷褂茫部山M合成復(fù)合熒光染料使用。

應(yīng)用：有機熒光材料在生物成像方面是種應(yīng)用性很強的發(fā)光材料，可廣泛應(yīng)用于熒光免疫，熒光探針，細(xì)胞染色等。包括特異性DNA染色、標(biāo)記蛋白質(zhì)、活體成像和環(huán)境檢測等領(lǐng)域研究。

優(yōu)點：有機熒光材料基于單光子激發(fā)過程，常以能量較高，波長較短的光激發(fā)，發(fā)射光具有能量較低，波長較長的特點。高選擇性、高靈敏度、高熒光量子產(chǎn)率等都是有機熒光化合物的優(yōu)點。

分類：熒光染料的種類繁多，其中羅丹明和熒光素應(yīng)用廣泛的兩種熒光染料。此外常見的熒光染料還有香豆素類、近紅外類、BODIPY類、菁染料、NBD胺類染料等。

一、 BODIPY類

Bodipy氟化硼二吡咯類熒光染料相對比于熒光素、羅丹明或者菁染料有著較高的量子產(chǎn)率、高摩爾消光系數(shù)、良好的光學(xué)穩(wěn)定性和對PH不敏感的優(yōu)點被廣泛應(yīng)用于生物標(biāo)記、熒光探針及生物成像。

該類染料激發(fā)波長較長，一般都處于紅外區(qū)。BODIPY 的光譜峰寬比較窄，對光的感應(yīng)度很高，熒光染料的光穩(wěn)定性能非常優(yōu)越，分子的熒光量子產(chǎn)率非常高，一般都能達到0.6。

二、 羅丹明類：

羅丹明是由3、6位氨基取代的氧雜蒽母體與9位碳原子取代芳基構(gòu)成的一類有機熒光染料。經(jīng)典的羅丹明染料如羅丹明B、羅丹明6G、羅丹明101的吸收/發(fā)射波長在可見光區(qū)（500～600nm），不適于生物體熒光成像。

羅丹明可用作生物熒光染色劑的一種由三苯甲烷衍生的染料。在水中的溶解性較好，有吸收、發(fā)射波長較長(一般>500?nm)，光穩(wěn)定較好，熒光量子產(chǎn)率高等優(yōu)點。

三、 熒光素及衍生物：

熒光素是最常見的熒光染料之一。與強堿反應(yīng)生成熒光素鹽，易溶于水，并有強烈綠色熒光，熒光量子產(chǎn)率0.65（pH=7水溶液）?？墒乖S多生物具有熒光的物質(zhì)。它與ATP形成復(fù)合物（熒光素腺苷），然后再與熒光素酶(Luciferase)結(jié)合。

四、 菁染料類：

菁染料的最大吸收波長較大，λ的數(shù)值都會超過600 nm，因此，菁染料在近紅外區(qū)應(yīng)用于熒光標(biāo)記效果很理想。同樣，通過引入不同的基團，對菁染料的母體結(jié)構(gòu)有很大影響，從而改變菁染料的光譜性質(zhì)。另外，菁染料的熒光量子效率相比其他染料較低。

此外，菁染料（聚甲川菁染料）是一類優(yōu)良的熒光染料，由奇數(shù)個碳原子組成共振次甲基（甲川基）共軛鏈并被兩個含氮雜環(huán)封端構(gòu)成的一類共軛有機小分子體系。

菁染料通常都是疏水，為了增加這類染料的親水性，我們往往會引入強親水性的磺酸基團來改善其水溶性，Cy5 NHS ester（疏水性），Sulfo-Cy5 NHS ester（親水性）。

五、 香豆素類：

香豆素染料本身沒有熒光，但它與某些取代基結(jié)合后會發(fā)出熒光，香豆素染料中不同位置與不同取代基結(jié)合后，其熒光強度會發(fā)生變化。香豆素染料的Stokes 位移大、光穩(wěn)定性好、對細(xì)胞的穿透能力強，因此香豆素染料可應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)等生物領(lǐng)域。

六、 近紅外熒光染料：

近紅外熒光染料用于生物成像時，除了具有近紅外吸收/發(fā)射波長、還熒光具有良好的水溶性和較低的生物毒性，特異的組織或細(xì)胞靶向性以及良好的細(xì)胞穿透性等，從而達到更安全、、靈敏的熒光成像目的。

為了提高近紅外熒光染料的水溶性和生物相容性和較低的生物毒性，可以將一種高分子聚合物材料-聚乙二醇（PEG）修飾到熒光染料上，常見的有CY3-PEG-MAL, Cy5-PEG-NH2,Rhodamine B-PEG-NHS, CY7-PEG-COOH等等，經(jīng)過PEG修飾后的熒光染料還具有較長時間的體內(nèi)循環(huán)。

七、 NBD胺類

苯并呋咱類化合物是一種較強的熒光標(biāo)記物。能與氨基化合物在堿性條件下發(fā)生衍生化反應(yīng)，條件簡單，反應(yīng)時間短，衍生物穩(wěn)定性好，熒光檢測器測定時干擾峰少，靈敏度高。

相關(guān)部分產(chǎn)品：

Azo-Bodipy 685Azo-Bodipy 685

Azo-Bodipy 685 carboxylic acid

Sulfo-Azo-Bodipy 685 carboxylic acid

Azo-Bodipy 685 NHS ester

6-FAM, SE

5(6)-TAMRA

5-TAMRA

6-TAMRA

5(6)-TAMRA, SE

Cy5 NHS ester

Cy5.5 NHS ester

Cy7 NHS ester

Cy7.5 NHS ester

FITC-dextran

RB-Dextran

Benzo-Coumarin-380                             Ex/Em:380nm-540nm

Benzo-Coumarin-400                             Ex/Em:400nm-570nm

Benzo-Coumarin-420                             Ex/Em:420nm-570nm