組氨酸標(biāo)簽(his-tag)是蛋白純化的首選標(biāo)簽。蛋白質(zhì)研究和生產(chǎn)中多采用商品ni-次氨基三乙酸(ni-nta)凝膠作為親和層析樹脂純化組氨酸標(biāo)簽蛋白。下面瑞禧生物小編整理了一種用于組氨酸標(biāo)簽蛋白純化的納米二氧化硅顆粒的制備方法。

具體步驟如下：

步驟1，將納米二氧化硅顆粒超聲分散在乙醇中，加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷，常溫?cái)嚢瑁x心，得到氨基化的納米二氧化硅顆粒；

步驟2，將氨基化的納米二氧化硅顆粒用磷酸鹽緩沖液洗滌除去未反應(yīng)的3-氨基丙基三乙氧基硅烷，超聲分散在磷酸鹽緩沖液中，加入戊二醛溶液，常溫?cái)嚢?，反?yīng)結(jié)束后，磷酸鹽緩沖液洗滌，離心，得到醛基化的納米二氧化硅顆粒；

步驟3，醛基化的納米二氧化硅顆粒用磷酸鹽緩沖液重新懸浮，加入含亞氨基二乙酸的4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸溶液，常溫?cái)嚢?，?/span>tris-hcl緩沖液洗滌和重新懸浮，加入氰基硼氫化鈉溶液，常溫?cái)嚢?，離心，tris-hcl緩沖液洗滌，得到用于組氨酸標(biāo)簽蛋白純化的納米二氧化硅顆粒。

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