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UVA光處理對照組鈣蛋白陽性細(xì)胞數(shù)量略有增加,而空脂質(zhì)體和cRGD脂質(zhì)體+UVA處理組鈣蛋白陽性細(xì)胞數(shù)量分別增加。然而用2Cl、3£lipo2Cl和3£cRGD-lipo2Cl處理時,細(xì)胞鈣網(wǎng)蛋白的分布存在差異(如圖)。結(jié)果顯示,3×cRGD-lipo2Cl處理與通透細(xì)胞幾乎相同(圖a)。產(chǎn)生的熒光影像學(xué)分析進(jìn)一步證實(shí)了UVA激活后3£cRGD-lipo2Cl處理中鈣網(wǎng)蛋白蛋白的細(xì)胞內(nèi)陽性染色(圖b)。結(jié)果表明,在2Cl和3×lipo2Cl處理下,細(xì)胞內(nèi)鈣蛋白水平越來越高,3×cRGD-lipo2Cl檢測(圖a)。對于H22細(xì)胞,與對照組相比,單獨(dú)處理800 nM的2Cl化合物和300 nM的脂質(zhì)體2Cl的細(xì)胞群分布有一致的不同(圖c)。
H22細(xì)胞與MCF- 7細(xì)胞的主要區(qū)別在于,通透細(xì)胞鈣蛋白的熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)弱于非通透細(xì)胞鈣蛋白(圖c)。然而,3×cRGD-lipo2Cl在所有2Cl處理中仍然接近于滲透信號。此外,熒光成像分析也證實(shí)了3×cRGD-lipo2Cl對H22中鈣網(wǎng)蛋白的細(xì)胞內(nèi)染色(圖d)。所有結(jié)果表明,cRGD靶向脂質(zhì)體獨(dú)特并促進(jìn)了免疫原性細(xì)胞死亡標(biāo)記物ATP和HMGB1的細(xì)胞外釋放,以及低濃度2Cl化合物激活后細(xì)胞內(nèi)鈣蛋白標(biāo)記物的檢測。
長波紫外線激活后 cRGD 靶脂質(zhì)體2Cl 檢測鈣網(wǎng)蛋白(CRT)。
(a)與 MCF-7細(xì)胞中的其他脂質(zhì)體溶液和對照相比,cRGD 靶脂質(zhì)體2Cl 處理后2小時 CRT 陽性細(xì)胞的分布加上 UVA 光激活的流式細(xì)胞術(shù)分析;
(b)細(xì)胞 CRT 的熒光成像分析:3cRGD-lipo 2Cl (1.00 mM)和在 MCF-7細(xì)胞中2小時的 UVA 激活;
(c)-(d)類似的流式細(xì)胞術(shù)和 H22細(xì)胞中 CRT 的熒光成像分析。
H22細(xì)胞與MCF- 7細(xì)胞的主要區(qū)別在于,通透細(xì)胞鈣蛋白的熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)弱于非通透細(xì)胞鈣蛋白(圖c)。然而,3×cRGD-lipo2Cl在所有2Cl處理中仍然接近于滲透信號。此外,熒光成像分析也證實(shí)了3×cRGD-lipo2Cl對H22中鈣網(wǎng)蛋白的細(xì)胞內(nèi)染色(圖d)。所有結(jié)果表明,cRGD靶向脂質(zhì)體獨(dú)特并促進(jìn)了免疫原性細(xì)胞死亡標(biāo)記物ATP和HMGB1的細(xì)胞外釋放,以及低濃度2Cl化合物激活后細(xì)胞內(nèi)鈣蛋白標(biāo)記物的檢測。
長波紫外線激活后 cRGD 靶脂質(zhì)體2Cl 檢測鈣網(wǎng)蛋白(CRT)。
(a)與 MCF-7細(xì)胞中的其他脂質(zhì)體溶液和對照相比,cRGD 靶脂質(zhì)體2Cl 處理后2小時 CRT 陽性細(xì)胞的分布加上 UVA 光激活的流式細(xì)胞術(shù)分析;
(b)細(xì)胞 CRT 的熒光成像分析:3cRGD-lipo 2Cl (1.00 mM)和在 MCF-7細(xì)胞中2小時的 UVA 激活;
(c)-(d)類似的流式細(xì)胞術(shù)和 H22細(xì)胞中 CRT 的熒光成像分析。
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