熒光標(biāo)記技術(shù)是把熒光基團(tuán)的共價(jià)鍵連接到蛋白、核酸等能夠識(shí)別分子物質(zhì)上的一種技術(shù)。這種技術(shù)通過了熒光的信號(hào)物質(zhì)的特定基團(tuán)，與識(shí)別分子物質(zhì)的特定基團(tuán)反應(yīng)，從而完成其標(biāo)記過程，利用標(biāo)記物的熒光特性，來提供被檢測(cè)對(duì)象的信號(hào)。

由于膀胱癌靶向肽NYZL1的特異性,,為其臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)，以下是FITC標(biāo)記靶向肽NYZL1:

方法：

①采用固相化學(xué)合成法制備多肽及其異硫氰酸熒光素(FITC)連接肽,噻唑藍(lán)(MTT)鑒定其細(xì)胞毒性。

②采用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)FITC-NYZL1與人膀胱癌組織結(jié)合的特異性,以FITC-svNYZL1作陰性對(duì)照。

③應(yīng)用掃描激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)FITC-NYZL1與膀胱癌BIU-87,T24,E-J,5637細(xì)胞和腎癌KC細(xì)胞結(jié)合的特異性,以FITC-svNYZL1作陰性對(duì)照。

結(jié)果：

①成功制備了實(shí)驗(yàn)所需的化學(xué)合成肽,高效液相色譜純化和質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果顯示其純度高達(dá)98%,MTT結(jié)果表明化學(xué)合成肽對(duì)BIU-87細(xì)胞的增殖無影響。

②FITC-NYZL1標(biāo)記的膀胱癌組織出現(xiàn)了熒光富集,而其他組織未見熒光富集,FITC-svNYZL1標(biāo)記的各組織均未見熒光富集。

③與對(duì)照組相比,FITC-NYZL1在膀胱癌細(xì)胞上均有熒光富集,且不同膀胱癌細(xì)胞間平均熒光強(qiáng)度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

多肽NYZL1與膀胱癌組織,細(xì)胞均能特異結(jié)合,具有顯著的結(jié)合特異性,為膀胱癌的早期診斷和靶向治療提供了新的可能。

瑞禧多種熒光標(biāo)記多肽(以Cy3為例，可定制)

Cy3-RGD    Cy3標(biāo)記靶向癌細(xì)胞的多肽RGD

Cy3-cRGD

抗癌肽  寡肽分子P-CY3   抗卵巢癌多肽藥物

Cy3-AEYLR   Cy3標(biāo)記小分子肽AEYLR

Cy3-pHLIPCy3標(biāo)記低pH插入肽(pHLIP)

ZP-16多肽-Cy3     Cy3標(biāo)記ZP-16多肽熒光探針

Cy3-HS7肽   Cy3標(biāo)記HS7肽

Cy3-KCT-W1多肽  Cy3標(biāo)記腫瘤靶向KCT-W1多肽

Cy3-TCP-1多肽  Cy3標(biāo)記結(jié)腸癌腫瘤靶向多肽

CY3-ZL4     CY3標(biāo)記特異性結(jié)合短肽ZL4

CY3-GX1    CY3熒光標(biāo)記胃癌新生血管靶向性環(huán)肽GX1

CY3-多肽An1    CY3偶聯(lián)多肽An1

CY3-γ3     CY3標(biāo)記γ3多肽片段

CY3-FAPα肽     CY3修飾的FAPα作用底物肽段

CY3-NGR    CY3標(biāo)記的NGR環(huán)肽

CY3-c(CNGRC)    CY3標(biāo)記的c(CNGRC)環(huán)肽

CY3-PTS    CY3標(biāo)記穿膜小肽(PTS)

Cy3-P1c   Cy3標(biāo)記結(jié)締組織生長因子多肽(P1c)

CY3標(biāo)記VEGF125-136小肽

CY3標(biāo)記的凝血酶特異性肽

CY3-GPG      CY3標(biāo)記靶向腫瘤細(xì)胞的抗癌多肽(GPG)

CY3-HVGGSSV多肽    CY3標(biāo)記重組HVGGSSV多肽

Cy3-NYZL1   CY3標(biāo)記膀胱癌靶向肽NYZL1

CY3-CGNKRTR  CY3標(biāo)記腫瘤歸巢穿膜肽tLyP-1(CGNKRTR)  CY3-tLyP-1

Cy3標(biāo)記鬼筆環(huán)肽

Cy3標(biāo)記胸腺五肽(TP5)  Cy3-TP5

CY3標(biāo)記跨膜肽(TAT)  CY3-TAT

CY3標(biāo)記CMTM1-v5多肽

CY3標(biāo)記天蠶素抗菌肽

CY3標(biāo)記肺癌特異性結(jié)合多肽ZS-1    CY3-(ZS-1)