肝靶向給藥系統(tǒng)(Hepatic targeted drug delivery systems, HTDDS)是一種可以緩釋和控釋藥物的新型策略,能夠?qū)⑺幬镉行У剡f送到肝臟的病變部位,最大程度地發(fā)揮藥物的治療效果,降低毒副作用,減少給藥次數(shù)和用藥量,提高了藥物的治療指數(shù)、局部濃度和治療效果,對肝病的治療具有積極的推動作用,HTDDS可分為主動型和被動型兩種：

被動型一般是采用生物相容性好、毒性低的聚合材料裝載藥物,利用體循環(huán)代謝中的“增強滲透保留”效應(Enhanced permeation and retention effect, EPR)和肝臟網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬攝取作用發(fā)揮靶向傳遞的功能。

主動型是對載體進行一定的靶向修飾,定向地將藥物傳遞到特定的組織和細胞,常見的模式是利用配體-受體或抗原-抗體的特異性結(jié)合發(fā)揮作用。

首先,采用微波多肽固相合成法合成 HBVpreS1多肽(2-21Aa),序列為 NH2-GTNLSVPNPLGFFPDHQLDP-COOH,利用高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)、質(zhì)譜(Mass Spectrometry,MS)和離子肼質(zhì)譜(Ion Trap Mass Spectrometry,ITMS)對多肽產(chǎn)物進行表征,進一步進行乙?；投罐Ⅴ；揎椀玫蕉嚯?HBVpreS1/2-21myr。然后分別進行異硫氰酸熒光素(FITC)的熒光標記和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-馬來酰亞胺(DSPE-PEG2000-Mal)的磷脂基團修飾,熒光標記的多肽 HBVpreS1/2-21myr-FITC用于多肽靶向性的驗證,磷脂基團修飾的多肽產(chǎn)物HBVpreS1/2-21myr-PEG2000-DSPE,將作為脂質(zhì)體合成的原料與大豆磷脂、膽固醇等脂質(zhì)體配方成分混合一起,加熱并制備脂質(zhì)體。

(1)固相法合成的HBVpreS1多肽(2-21Aa)純度較高,合成工藝簡單、操作方便,合成效率高;高效液相色譜、質(zhì)譜和離子肼質(zhì)譜表征結(jié)果提示合成的多肽產(chǎn)物與設(shè)計的多肽序列GTNLSVPNPLGFFPDHQLDP分子量大小一致,序列吻合;
　　(2)成功進行了FITC的熒光標記和DSPE-PEG2000-Mal的磷脂基團修飾;

　(3)熒光標記的多肽HBVpreS1/2-21myr-FITC具有肝細胞NTCP受體靶向性;

　　(4)制備的熒光素鈉靶向納米脂質(zhì)體HBVpreS1/2-21myr-FS-LCL粒徑大小合適,平均值為(94.09±9.2) nm;脂質(zhì)體包封率較高為(89.32±1.02)%;制備工藝操作方便、簡單高效,穩(wěn)定性好;

(5)構(gòu)建的HepG2-NTCP、LO2-NTCP、HEK293-NTCP細胞和活體分離培養(yǎng)的樹鼩原代肝細胞可作為HBVpreS1/2-21myr和HBVpreS1/2-21myr-FS-LCL的體外靶向評價模型;

　(6)制備的熒光素鈉靶向納米脂質(zhì)體HBVpreS1/2-21myr-FS-LCL具有肝細胞NTCP受體靶向性。